Откриване на салмонела в храни с помощта на генни сонди
„Златният стандарт“ за откриване на салмонела в храната, базиран на методологията на конвенционалната култура, отнема много време и труд. Отнема от 3 до 5 работни дни, за да получите резултат. Поради това има голям интерес към разработването на бързи, чувствителни и специфични методи за откриване. В по-ранни проучвания е описана техника, при която 23S рибозомната субединица на Salmonella се открива в тъканите чрез in situ хибридизация с помощта на флуоресцентно белязани генни сонди.
FANG и др. проверено до каква степен този метод FISH (флуоресцентна in situ хибридизация) е подходящ за откриване на Salmonella в храни (Q. FANG, S. BROCKMANN, K. BOTZENHART, A. WIEDEMANN: Подобрено откриване на Salmonella spp. в храни чрез флуоресцентно в situ хибридизация с 23S rRNA сонди: сравнение с конвенционални методи на култура).
За своите изследвания авторите са използвали три олигонуклеотидни сонди (Sal-1, Sal-3, Sal-544), които са видово специфични за 23S rRNA на Salmonella. Общо 51 щама Salmonella от различни серовари и 46 щама от други видове Enterobacteriaceae и видове от други семейства бяха тествани с тези сонди. Всички щамове Salmonella са хибридизирани със сондите и не са наблюдавани кръстосани реакции с другите изолати, различни от Salmonella. Освен това беше проучено дали различното съхранение на тестовите щамове преди провеждането на метода FISH може да повлияе на резултатите. Не се наблюдава влияние на условията на съхранение на тестовите щамове върху ефективността.
Изследването на 18 различни вида храни показа, че различните матрици също не оказват влияние върху резултатите от теста. С помощта на метода FISH Salmonella е открита в 52 (сонда Sal-1), 56 (сонда Sal-3) и 36 от 225 нативни проби. Използвайки стандартни конвенционални методи за култивиране, Salmonella е изолирана само от 30 от 225 проби.
Източник: Pichner [ PICHNER ]
