Determinarea speciilor de animale în produsele din carne prin PCR - posibilități și limite

A 39-a Săptămână Kulmbach

Începând cu 1.7.2003 iulie 97, alimentele ambalate care sunt vândute consumatorului final pot trebui să fie etichetate conform ghidurilor QUID (Declarația Cantitativă a Ingredientelor) în conformitate cu Directiva UE RL4/XNUMX/EG. Legiuitorul speră ca noua obligație de etichetare să ofere consumatorilor informații mai obiective la achiziționarea produselor și astfel să le permită să facă o alegere „mai bună”. În cursul acestei dezvoltări, metodele de cuantificare a componentelor animale din alimente devin, de asemenea, din ce în ce mai importante.

În prezent se fac eforturi mari pentru a oferi metode cantitative pentru determinarea ingredientelor animale. Primele sisteme pentru bovine și porcine sunt deja disponibile comercial și utilizate în monitorizare. Aceste sisteme sunt capabile să determine proporția de carne într-o specie animală relativ, adică în raport cu proporția totală de carne, prin raportarea numărului de copii ale unei gene specifice unui animal (genă țintă) la numărul de copii ale unei gene generale. genă specifică animalului (genă de referință).

Am dezvoltat un sistem de cuantificare pentru specia animală de capră, care face posibilă determinarea semicantitativă a proporției de carne de capră în produsele din carne. O secțiune lungă de ADN de 97 bp (perechi de baze) din gena miostatinei servește ca genă de referință pentru conținutul total de carne. Pentru capre a fost dezvoltat un sistem specific primer-sondă bazat pe gena nucleară cu o singură copie beta-cazeină. Validarea sistemului a fost efectuată pe probe de cârnați fierți cu procente de carne de capră de 2% până la 100%, produse la diferite niveluri de încălzire. Reacția în lanț a polimerazei (PCR) a fost utilizată pentru a determina numărul de copii. Secțiunile de ADN au fost amplificate folosind sistemul PCR în timp real Rotor Gene 2000. Proporția relativă de carne de capră în raport cu conținutul total de carne din produsul din carne a fost calculată pe baza metodei delta-delta CT.

Investigațiile efectuate pe probele de referință arată că o determinare semicantitativă a conținutului de carne din produsele din carne este posibilă în principiu cu o incertitudine de măsurare stabilită de 20 - 40%. Cu toate acestea, fiabilitatea rezultatelor depinde de gradul de prelucrare (temperatura, valoarea pH-ului, forțele de forfecare, activitatea enzimatică) a probei examinate, tipul de țesut și fluctuațiile sale naturale în conținutul de ADN. Țesutul adipos are doar un sfert din cantitatea de ADN în comparație cu țesutul muscular. În schimb, conținutul de ADN din ficat este de aproximativ zece ori mai mare decât cel din țesutul muscular. Utilizarea ficatului în produsele din carne și conținutul de grăsimi influențează așadar cuantificarea conținutului de carne.

S-ar putea arăta că gradul de prelucrare și tratare a produsului din carne trebuie luat în considerare individual la determinarea rezultatelor. În această condiție, este posibil să se distingă cantități mici (contaminare) de aproximativ 1 - 2% sau mai puțin de părțile de carne care determină valoarea (>10%).

Sursa: Kulmbach [ R. BINKE, Katrin ALTMANN, F. SCHWÄGELE ]