Виявлення сальмонели в їжі за допомогою генних зондів
«Золотий стандарт» виявлення сальмонели в харчових продуктах, який базується на традиційній культуральній методології, вимагає багато часу та праці. Отримання результатів займає від 3 до 5 робочих днів. Тому існує великий інтерес до розробки швидких, чутливих і специфічних методів виявлення. У попередніх дослідженнях була описана методика, за якою субодиниця рибосоми 23S Salmonella була виявлена в тканинах за допомогою гібридизації in situ з використанням мічених флуоресценцією генних зондів.
FANG та ін. перевірено, наскільки цей метод FISH (флуоресцентна гібридизація in situ) підходить для виявлення сальмонели в харчових продуктах (Q. FANG, S. BROCKMANN, K. BOTZENHART, A. WIEDEMANN: Покращене виявлення Salmonella spp. у харчових продуктах за допомогою флуоресцентних гібридизація situ із зондами 23S рРНК: порівняння зі звичайними методами культивування).
Для своїх досліджень автори використовували три олігонуклеотидні зонди (Sal-1, Sal-3, Sal-544), які були видоспецифічними для 23S рРНК Salmonella. Загалом 51 штам Salmonella різних сероварів і 46 штамів інших видів Enterobacteriaceae та видів інших сімейств були протестовані за допомогою цих зондів. Усі штами Salmonella гібридизувалися із зондами; перехресної реакції з іншими ізолятами, що не належать до виду Salmonella, не спостерігалося. Крім того, було перевірено, чи може вплинути на результати зберігання тестових штамів по-іншому перед проведенням методу FISH. Вплив умов зберігання досліджуваних штамів на ефективність не спостерігався.
Перевірка 18 різних видів їжі показала, що різні матриці також не вплинули на результати тесту. За допомогою методу FISH сальмонели виявлено у 52 (зонд Sal-1), 56 (зонд Sal-3) та 36 із 225 нативних проб. Використовуючи стандартні звичайні методи культури, Salmonella була виділена лише з 30 з 225 зразків.
Джерело: Pichner [ PICHNER ]
